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考研論壇

標(biāo)題: 求助～～～細(xì)胞題不會(huì)做 [打印本頁(yè)]
作者: 劉丹494252734    時(shí)間: 2014-12-25 17:01
標(biāo)題: 求助～～～細(xì)胞題不會(huì)做
1將某種標(biāo)記的蛋白質(zhì)與某種細(xì)胞器分別加入離心管后共同離心，從分離的細(xì)胞器中發(fā)現(xiàn)有標(biāo)記物出現(xiàn)，試分析結(jié)果？
2在同一個(gè)細(xì)胞內(nèi),用羅丹123試劑標(biāo)記線粒體和用熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)，問(wèn)他們的分布特點(diǎn)及原因？
麻煩答案詳細(xì)點(diǎn)…謝謝
作者: asuka2015    時(shí)間: 2014-12-25 23:04
就是你用小分子熒光有機(jī)物共價(jià)結(jié)合的蛋白質(zhì)的定位在哪里，熒光顯微鏡就會(huì)觀測(cè)到哪里有熒光。不明白你問(wèn)啥?
作者: 劉丹494252734    時(shí)間: 2014-12-26 00:05
asuka2015 發(fā)表于 2014-12-25 23:04
就是你用小分子熒光有機(jī)物共價(jià)結(jié)合的蛋白質(zhì)的定位在哪里，熒光顯微鏡就會(huì)觀測(cè)到哪里有熒光。不明白你問(wèn)啥? ...

題目就這樣寫(xiě)的，我一個(gè)字都沒(méi)漏打下來(lái)的…
作者: asuka2015    時(shí)間: 2014-12-26 00:24
1.如果是小分子標(biāo)記說(shuō)明這種細(xì)胞器里有被標(biāo)記的該蛋白質(zhì)或者該蛋白質(zhì)接近標(biāo)記部位的那一部分，如果它被切割或者降解了的話；也可能只是氨基酸的被標(biāo)記二進(jìn)入該細(xì)胞器的蛋白成分，總之同位素小分子熒光有機(jī)分子標(biāo)記的蛋白質(zhì)即使降解也可能進(jìn)入一些細(xì)胞器，不一定表示被標(biāo)記的蛋白質(zhì)就一定在該細(xì)胞器里，必須需要在細(xì)胞器中分離到被標(biāo)記的完整蛋白質(zhì)才能確證。如果想GFP之類(lèi)的熒光蛋白質(zhì)標(biāo)記，蛋白質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞器的可能性比較大。
作者: asuka2015    時(shí)間: 2014-12-26 01:07
本帖最后由 asuka2015 于 2014-12-26 01:09 編輯

第二題，我現(xiàn)在答不出來(lái)。
作者: asuka2015    時(shí)間: 2014-12-26 11:22
第2題答：
熒光染料羅丹明123（Rh123）是一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。Rh123可透過(guò)細(xì)胞膜且在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集，并發(fā)出黃綠色熒光。Rh123用于對(duì)許多種細(xì)胞進(jìn)行染色，包括植物細(xì)胞和細(xì)菌。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與Rh123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性，此熒光染料被應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的ATP。Rh123還用于癌癥研究。所以用羅丹明123染色出現(xiàn)的標(biāo)記熒光的范圍一般只會(huì)分布于線粒體內(nèi)。用熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)，會(huì)根據(jù)蛋白質(zhì)是否具有特定的進(jìn)入細(xì)胞器的標(biāo)簽（比如NLS）決定蛋白質(zhì)的具體的分布區(qū)域（有期待有的熒光標(biāo)簽顯示出來(lái)）。熒光標(biāo)簽都有點(diǎn)一定壽命。
作者: 劉丹494252734    時(shí)間: 2014-12-26 11:37
asuka2015 發(fā)表于 2014-12-26 11:22
第2題答：
熒光染料羅丹明123（Rh123）是一種可對(duì)活細(xì)胞線粒體染色的細(xì)胞染色試劑。Rh123可透過(guò)細(xì)胞膜且在 ...

謝謝……
作者: calorimetry    時(shí)間: 2015-6-4 16:11
考研試題還有考的這么細(xì)節(jié)的實(shí)驗(yàn)操作的。。。。
作者: calorimetry    時(shí)間: 2015-6-4 16:11
考研試題還有考的這么細(xì)節(jié)的實(shí)驗(yàn)操作的。。。。



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